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等度洗脱和梯度洗脱-鬼峰捕集小柱

2018-11-07

 

一, 概念

 等度洗脱isocratic elution是在样品组分的分析周期中,流动相的组成比例和流速恒定不变的洗脱方式。

梯度洗脱(gradient elution)又称为梯度淋洗或程序洗脱。在同一个分析周期中,按一定程度不断改变流动相的浓度配比,称为梯度洗脱。

二, 使用原则

   在能达到较好的分离度的情况下优先使用等度洗脱除非有以下情况:

1)杂质和主成分极性相差很大,杂质一定要全部都能洗脱出来(有时等度情况下冲两三个小时杂质也冲出不来,就必须考虑用梯度)。
2)杂质和主成分极性相差较大,杂质出峰太晚(等度冲两个小时出来个杂质,就可以通过梯度缩短检样时间)
3)杂质极性比主峰的大,杂质分开主峰又出峰太晚,这种情况也得考虑梯度洗脱。

  三,  梯度洗脱的优点

(1) 可以使各个组分都满足保留在0.5<k<20的范围内;

(2) 避免出现强保留的物质滞留在色谱柱中,损坏柱子,甚至在下一次的进样色谱图中形成“鬼峰”;

(3) 适合分析一些大分子化合物;

(4) 避免进样量体积较大时产生的峰展宽。

四,  梯度洗脱的缺点   

(1) 比等度洗脱方法的建立和日常应用更为复杂、困难;

(2) 一些检测器不适合用梯度洗脱,如RI

(3) 由于周期间不同仪器分离结果有差异,重现性不如等度洗脱;

(4) 梯度洗脱的基线更容易发生漂移,所以需要更纯的溶剂;

(5) 梯度洗脱的基线更容易产生鬼峰,甚至鬼峰紧挨着主峰出现,对数据分析产生影响;

(6) 含有三乙胺、离子对试剂等添加剂的流动相由于平衡较慢,分离的重现性差而不合适采购梯度洗脱。

五,  梯度洗脱的方式

主要有线性梯度、曲线梯度、分段梯度三种。其中线性梯度最为常用。

六, 鬼峰捕集小柱

1, 概念:它是一种用来消除或者减小由于有机相中污染物、水相中污染物、缓冲盐、流动相瓶、色谱柱混合过程产生的鬼峰的柱子。

2, 产生的背景:由于在方法开发中产生的鬼峰,消除鬼峰需要花费分析人员较多的时间和精力。

3, “色谱先生”鬼峰捕集柱:它是由国内多位有着丰富大企业实战经验的研发人员研制而成,通过前期的大量实验数据验证了其捕集效果和寿命都要高于目前市面上主打的品牌。

4, “色谱先生”应用实例:

5.1 磷酸盐体系

 

       5.2 醋酸盐体系

        

鬼峰捕集柱信息详情点击http://yzmiaow27.com/product.aspx?id=135

 

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