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YMC反相C18色谱柱压力异常以及应对方案

2018-11-07

 同学们在使用液相色谱柱的时候,肯定遇到过压力异常升高的情况,遇到此类情况先不要慌,我们有条有理一步一步排查,找到原因然后解决。

由于最常用的是反相C18色谱柱,以此为例重点讲解。

1、先把色谱柱卸下来看看柱压,如果柱子卸下来柱压还是挺高的那么就不是色谱柱堵了,而是其他地方堵塞,这个时候要冲洗系统,注意千万不能接检测器。冲洗系统可添加适当比例的异丙醇。

2、若是进样管路堵塞,卸下进样阀和柱子之间那根细管丝,放入异丙醇中(浸没),超声1小时以上。

3、若柱子卸下来压力正常,很大可能是色谱柱发生堵塞,若使用的流动相或者样品中含有盐存在,可能盐析出导致色谱柱里面堵塞,压力升高。此时可用10%乙腈(乙腈:水=10:90)低流速冲洗,流速可设置0.5ml/min以下,至少冲洗40min以上,观察压力的变化,若压力缓缓下降,可慢慢调高流速冲洗,直至压力正常。

4、若压力始终没有下降,反而还有升高的趋势,考虑是否有不溶物进入色谱柱,此时将色谱柱反接,反冲色谱柱尤其要注意不能接检测器,要是还有盐的样品也还是要用高比例的水冲洗的,10%乙腈冲洗,同时满足条件:流速<0.2ml/min、压力<7Mpa(针对的是常规规格5um250*4.6mm色谱柱)。

冲洗的时间根据发现压力异常的时间为准,若压力异常升高立即判断排查,反冲的时间为1-2小时;若压力异常之后一直正冲很长时间,则需过夜冲洗甚至更长时间。若样品中不含盐,可选用一些溶解性较好的溶剂,例如异丙醇来冲洗,由于异丙醇粘度较大,要时刻关注柱压的情况。

 

在处理压力的同时,也要注意色谱柱的使用条件限制,比如常规硅胶色谱柱可能不耐受高水相的冲洗,这样会导致色谱填料键合相脱落,柱效快速下降,甚至反冲的时候要关注色谱柱的筛板性能以及填料的填充密度,YMC-Triart系列色谱柱很好的继承了过往耐纯水的优良特色,以及填料的装填层次,筛板的稳固性,即使反冲和反用也不会将填料冲出。

 

 

填料

颗粒径

µm

微孔径

nm

 

官能团

 

端基封尾

使用pH

范围

使用温度范围

常用温度

(推荐

上限温度

Triart C18

 

 

 

 

 

1。9, 3, 5

12

 

C18

 

 

 

 

 

1.012.0

 

 

2040

 

pH 17  90

pH 71250 

Triart C18 ExRS

8

Triart C8

 

 

12

C8

Triart Phenyl

Phenyl

1。010.0

2040

50

Triart PFP

Pentafluorophenyl

1.08.0

2040

50

 

Triart Bio C4

 

30

 

C4

 

 

1.0~10.0

 

2040

pH 17  90

pH 71050 

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